Hogyan válasszunk 96 lyukú PCR lemezt multiplex qPCR-hez?

Sziasztok kutatótársak és laborrajongó kollégák! Ha a multiplex qPCR-t szereti, tudja, milyen döntő fontosságú a megfelelő 96 lyukú PCR lemez kiválasztása. A 96-wells PCR Plate szállítójaként saját bőrömön tapasztaltam a rossz lemez kiválasztásának hatását a kísérletekre. Tehát nézzük meg, hogyan hozhatja meg a legjobb választást a multiplex qPCR igényeihez.

Kompatibilitás az Ön Thermal Cycler-ével

Először is, a 96 lyukú PCR lemeznek kompatibilisnek kell lennie a hőciklussal. A különböző hőciklusok eltérő specifikációkkal rendelkeznek a behelyezhető lemezekre. Ellenőriznie kell a lemez méreteit, például magasságát, mélységét és külső átmérőjét. A nem megfelelően illeszkedő lemez egyenetlen fűtéshez és hűtéshez vezethet, ami nagyon megzavarja a qPCR eredményeit.

Egyes hősugárzók bizonyos típusú lemezekhez készültek, például alacsony profilú vagy szabványos profillemezekhez. Győződjön meg arról, hogy tudja, mire van szüksége a thermocyclernek. Például, ha a hőciklus alacsony profilú lemezekre van optimalizálva, a szabványos profillemez használata rossz hőátadást okozhat. Tehát mindig kétszer – vásárlás előtt ellenőrizze a kompatibilitást.

Anyagi ügyek

A 96 lyukú PCR lemez anyaga óriási szerepet játszik a multiplex qPCR sikerében. A legtöbb lemez polipropilénből vagy polisztirolból készül. A polipropilén lemezek rendkívül népszerűek, mert ellenállnak a vegyszereknek és jó hőstabilitásúak. A PCR-ben alkalmazott magas hőmérsékletet deformáció nélkül képesek ellenállni.

Másrészt a polisztirol lemezek olcsóbbak és átlátszóbbak, ami hasznos lehet, ha vizuálisan meg kell vizsgálnia a mintákat. Azonban nem annyira hőállóak, mint a polipropilén lemezek. A multiplex qPCR-hez, ahol több reakcióval foglalkozik egy lemezen, azt javaslom, hogy polipropilén lemezeket használjon. Konzisztensebb eredményeket adnak, és kevésbé valószínű, hogy problémákat okoznak a fűtési és hűtési ciklusok során.

Nos tervezés és forma

A 96 lyukú PCR lemezen lévő lyukak kialakítása és alakja szintén befolyásolhatja a qPCR-t. A kerek fenekű kutak kiválóan alkalmasak a minta térfogatának minimalizálására és a párolgás kockázatának csökkentésére. Lehetővé teszik a reagensek jobb keverését is. A lapos fenekű kutak viszont jobbak az optikai detektáláshoz, mivel nagyobb felületet biztosítanak a detektálható fluoreszcens jel számára.

Ha multiplex qPCR-t végez kis mintamennyiséggel, akkor a kerek fenekű lyukak a megfelelő megoldást jelenthetik. De ha a pontos optikai érzékelés az elsődleges, a lapos fenekű kutak jobb választás lehet. Egyes tányérokhoz kerek - és lapos - fenekű üregek kombinációja is tartozik, így mindkét világból a legjobbat nyújtja.

Lemeztömítési lehetőségek

A 96 lyukú PCR lemez megfelelő lezárása elengedhetetlen a párolgás és a szennyeződés elkerülése érdekében. Számos tömítési lehetőség áll rendelkezésre, például öntapadós tömítések, hővel hegeszthető fóliák és kupakok. Az öntapadó tömítések használata egyszerű, és maradék nélkül eltávolítható. A hővel lezárható fóliák légtömörebb tömítést biztosítanak, ami kiválóan alkalmas a hosszú távú tároláshoz és megakadályozza a párolgást a PCR ciklusok során.

A kupakok egy másik lehetőség, különösen akkor, ha többször kell hozzáférnie az egyes kutakhoz. Újra felhasználhatók, amivel hosszú távon pénzt takaríthat meg. A tömítési lehetőség kiválasztásakor vegye figyelembe konkrét kísérleti igényeit. Ha hosszú távú kísérletet folytat, egy hővel hegeszthető fólia lehet a legjobb választás. De ha gyakran kell hozzáférnie a kutakhoz, a kupak kényelmesebb lehet.

Optikai tisztaság

A multiplex qPCR-ben a fluoreszcencia-detektálásra támaszkodik a cél-DNS amplifikációjának mérésére. Ezért olyan fontos a 96 lyukú PCR lemez optikai tisztasága. A jó optikai tisztaságú lemez pontos és érzékeny fluoreszcencia-detektálást tesz lehetővé.

Keressen olyan lemezeket, amelyek alacsony autofluoreszcenciájú anyagokból készültek. Ez azt jelenti, hogy maga a lemez nem bocsát ki nem kívánt fluoreszcens jeleket, amelyek zavarhatják a méréseket. Egyes lemezeket speciális bevonattal is elláttak, hogy javítsák az optikai tisztaságot és csökkentsék a háttérzajt.

Költség – Hatékonyság

Valljuk be, a költségek mindig számítanak a laboratóriumi kellékek beszerzésénél. Bár nem akar kompromisszumot kötni a minőség terén, de nem akarja a bankot sem. Ha 96 lyukú PCR lemezt választ a multiplex qPCR-hez, hasonlítsa össze a különböző márkák és szállítók árait.

Ne feledje, hogy nem mindig a legolcsóbb megoldás a legjobb. Néha egy kicsit drágább lemez hosszú távon pénzt takaríthat meg azáltal, hogy konzisztensebb eredményeket biztosít, és csökkenti az ismételt kísérletek szükségességét. Keressen olyan beszállítókat, amelyek tömeges kedvezményeket vagy hűségprogramokat kínálnak. Ez segíthet a legjobb ár-érték arány elérésében.

Egyéb megfontolandó lehetőségek

Ha nem biztos abban, hogy a 96 lyukú PCR lemez a megfelelő választás a multiplex qPCR-hez, akkor más lehetőségek is rendelkezésre állnak. Érdemes megnézni384 Wells PCR lemezha több reakciót kell lefuttatnia egy kisebb helyen. Kiválóan alkalmasak nagy áteresztőképességű szűrésre.

Vagy ha inkább egyéni reakciókkal szeretne dolgozni,Egyedi Pcr csöveklehetne jobb választás. Nagyobb rugalmasságot kínálnak, és könnyebben kezelhetők, ha kis számú mintával dolgozik.

Következtetések és vásárlási útmutató

A megfelelő 96 lyukú PCR lemez kiválasztása a multiplex qPCR-hez olyan döntés, amely nagy hatással lehet a kísérletek sikerére. Az olyan tényezők figyelembevételével, mint a kompatibilitás, az anyag, a kút kialakítása, a tömítési lehetőségek, az optikai tisztaság és a költséghatékonyság, megalapozott döntést hozhat.

Beszállítóként a96 lyukú PCR lemez, Azért vagyok itt, hogy segítsek megtalálni az igényeinek megfelelő tányért. Ha bármilyen kérdése van, vagy további információra van szüksége, ne habozzon kapcsolatba lépni. Megbeszélhetjük egyedi igényeit, és segítünk kiválasztani a legjobb lemezt a multiplex qPCR-kísérletekhez. Legyen szó kis kutatólaboratóriumról vagy nagyszabású biotechnológiai vállalatról, nálunk megtaláljuk a szükséges megoldásokat. Kezdjük hát együtt ezt az utat, és tegyük sikeressé multiplex qPCR-kísérleteit!

Hivatkozások

• Bustin, SA, Benes, V., Garson, JA, Hellemans, J., Huggett, J., Kubista, M., ... & Wittwer, CT (2009). A MIQE irányelvei: minimális információ a kvantitatív valós idejű PCR-kísérletek publikálásához. Clinical Chemistry, 55(4), 611-622.
• Nolan, T., Hands, RE és Bustin, SA (2006). Az mRNS mennyiségi meghatározása valós idejű RT-PCR segítségével. Nature Protocols, 1(3), 1559-1582.